基于AhsA蛋白的嗜水氣單胞菌特異性抗體的制備與鑒定
關(guān)鍵詞：嗜水氣單胞菌 ahsa蛋白 多克隆抗體
摘要：選取嗜水氣單胞菌表面特異性抗原蛋白AhsA,構(gòu)建了pET-28a(+)-AhsA表達(dá)載體,并在大腸桿菌BL21中進(jìn)行表達(dá),利用Ni-NTA親和層析、凝膠過(guò)濾層析等蛋白純化方法進(jìn)行純化。重組蛋白表達(dá)效果較好,濃度可達(dá)10mg·mL^-1,純度可達(dá)90%以上,符合制備多克隆抗體的免疫原標(biāo)準(zhǔn)。利用WesternBlot技術(shù)將AhsA抗體特定識(shí)別免疫原蛋白,結(jié)果表明該抗體能夠特異性識(shí)別免疫原蛋白AhsA,而對(duì)于牛血清蛋白卻不能發(fā)生免疫應(yīng)答,表明該抗體具有一定的特異性且AhsA蛋白具有很好的免疫原性。同時(shí)通過(guò)檢測(cè)驗(yàn)證了AhsA蛋白抗體能夠特異性檢測(cè)嗜水氣單胞菌,將為水產(chǎn)品質(zhì)量控制及臨床檢測(cè)嗜水氣單胞菌可提供新的技術(shù)。
大連民族大學(xué)學(xué)報(bào)雜志要求:
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