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LAMP技術(shù)在感染乙腦病毒致倦庫(kù)蚊混合樣本檢測(cè)中的應(yīng)用
關(guān)鍵詞：lamp 乙腦病毒 混合樣本
摘要：為建立媒介蚊蟲(chóng)自然感染種群樣本攜帶病原體快速靈敏的檢測(cè)技術(shù),本研究將實(shí)驗(yàn)室經(jīng)口感染乙腦病毒的致倦庫(kù)蚊陽(yáng)性樣品和未感染乙腦病毒的陰性樣品按一定比例混合成混合樣本,分別采用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time Fluorescent Quantitative PCR,qPCR)檢測(cè)方法,對(duì)感染乙腦病毒的致倦庫(kù)蚊混合樣本進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示:當(dāng)陽(yáng)性樣本在混合樣本中所占比例為0.01%時(shí),LAMP仍然可檢測(cè)到病原體;定量PCR的最低檢出比例是陽(yáng)性樣本在混合樣本中所占0.14%以上。通過(guò)進(jìn)一步優(yōu)化反應(yīng)體系各組分的濃度、反應(yīng)時(shí)間和溫度,建立了靈敏性高的LAMP擴(kuò)增方法。
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