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攜帶小鼠β-珠蛋白基因的安全性慢病毒載體的優(yōu)化研究
劉亞楠; 楊冠恒; 陳媛; 張敬之 上海交通大學附屬兒童醫(yī)院; 上海市兒童醫(yī)院; 上海交通大學醫(yī)學遺傳研究所; 上海市200040; 衛(wèi)生部醫(yī)學胚胎與分子生物學重點實驗室; 上海市胚胎與生殖工程重點實驗室; 上海市200040
關(guān)鍵詞：自刪除型慢病毒載體 基因治療 表達優(yōu)化
摘要：目的 對基因治療β-地中海貧血 ( β-thalassemia, 簡稱β-地貧) 的安全性自刪除慢病毒載體進行優(yōu)化.方法 通過對比3種啟動子預測軟件的分析結(jié)果, 設計并構(gòu)建包含3種不同長度的小鼠珠蛋白基因 (β-globin) 啟動子的表達載體;在Cos7細胞水平上檢驗其報告基因及小鼠β-珠蛋白基因的表達效率.隨后, 進行安全性慢病毒載體的構(gòu)建及病毒包裝, 并在細胞水平檢驗了其自刪除效率及表達β-珠蛋白基因的效果.結(jié)果 長度為750 bp的小鼠β-globin啟動子表達效果最佳, 且所構(gòu)建的慢病毒載體Lenti-Mhbb經(jīng)病毒包裝, 在細胞水平可有效的進行功能性表達及自刪除.結(jié)論 優(yōu)化了基因治療β-地貧的安全性自刪除慢病毒載體.
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