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甜菜抗逆基因P5CS的克隆及鹽脅迫下的表達(dá)分析
關(guān)鍵詞：甜菜 鹽脅迫 p5cs基因 生物信息學(xué)分析
摘要：脯氨酸在植物適應(yīng)逆境脅迫中起重要作用,脯氨酸合成酶(Proline synthetase)是脯氨酸合成代謝的關(guān)鍵酶,深入研究編碼該酶的基因,對了解逆境下脯氨酸積累的分子機(jī)理、提高其抗逆性意義重大。本研究采用RT-PCR技術(shù)從甜菜中克隆了△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因,利用生物信息學(xué)方法對序列進(jìn)行了比對及其理化特性、結(jié)構(gòu)域分析,該基因ORF為2 151 bp,編碼由716個(gè)氨基酸組成的蛋白。序列已提交到GENBANK(ID:KY019201)。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)測定不同時(shí)間高鹽(300 mmol/L NaCl)脅迫下對甜菜幼苗葉片P5CS基因相對表達(dá)量的影響,結(jié)果表明:隨著處理時(shí)間的延長,幼苗受脅迫程度加深,P5CS基因的表達(dá)上調(diào)明顯,進(jìn)一步說明該基因響應(yīng)逆境脅迫,本研究為今后深入研究提供了依據(jù)。
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