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細胞培養(yǎng)氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記-質(zhì)譜技術(shù)測定槲皮素對人肝癌細胞熱休克蛋白表達的影響
關(guān)鍵詞：槲皮素 hepg2細胞 熱休克蛋白
摘要：目的觀察槲皮素對人肝癌細胞HepG2中熱休克蛋白（HSP）發(fā)達的影響，為其抗腫瘤活性探尋可能的靶點。方法經(jīng)過連續(xù)傳代，充分氚化HepG2細胞中的亮氨酸，并鑒定其標(biāo)記率。采用四早基偶氮唑藍（MTT）法檢測槲皮素對HepG2細胞中的亮氨酸,并鑒定其標(biāo)記率。采用四早基偶氮唑藍（MTT）法檢測槲素對HepG2細胞生長的抑制活性及有效濃度。以50μmol/L槲皮素作用氚化HepG2細胞45h后，與正常HepG2細胞按1：1等量混合電泳，提肽后時行質(zhì)譜鑒定，將獲得的肽片段數(shù)據(jù)進行Mascot檢索。結(jié)論SILAC-MS成熟可靠，能全面定量分析外因作用前后HepG2細胞中全系列蛋白譜的變化，槲皮素對HepG2細胞中HSP表現(xiàn)出強烈的抑制能力，并且這種作用可能是其發(fā)揮腫瘤活性的途徑之一。
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